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百日核杆菌用什么运送培养基

采集呼吸道标本检测百日咳鲍特菌,优先推荐采集鼻咽拭子,其次鼻咽吸取液。(GPS,强推荐)关于这点可以看下《鼻咽拭子检测百日咳结果更准确这篇文章

实施建议:

(1)对于鼻咽拭子,推荐使用涤纶、人造丝或者植绒拭子。若用于细菌培养,如果不能立即接种平板,则将鼻咽拭子置于Regan-Lowe运送培养基中,保存温度为2~8 ℃,应在24 h内运送至实验室;若仅用于PCR检测,则将鼻咽拭子置于无菌容器中(干或者含通用转运液),冻存于-20 ℃及以下温度。

(2)对于鼻咽吸取液,无菌吸取至少0.5 ml样品于防渗漏的无菌塑料管中,若72 h内可运送至实验室,则置于2~8 ℃保存,否则冻存于-20 ℃及以下的温度。

文献回顾:

有2项研究探讨了呼吸道标本种类对百日咳鲍特菌的分离培养的影响:

1项美国研究显示,鼻咽拭子的百日咳鲍特菌分离阳性率为95%,而咽拭子的阳性率仅为44%(相应的鼻咽拭子皆为阳性);另1项克罗地亚的研究显示,鼻咽拭子和鼻咽吸取液的百日咳鲍特菌分离阳性率皆为73.9%,而咽拭子仅为17.0%(相应的鼻咽拭子皆为阳性)。有1项研究专门探讨了不同材料的拭子(藻酸钙、涤纶和植绒)采集鼻咽部样品后对百日咳鲍特菌的分离培养和PCR的影响,发现藻酸钙拭子会抑制PCR反应,而3种材料的拭子都可用于百日咳鲍特菌的分离培养,并发现含炭的Amies运送液效果差。

1项研究比较不同运输温度(分别为-20、4、25和35 ℃)和运输介质[Regan-Lowe运送培养基、Regan-Lowe及半强度琼脂运送培养基、添加α-酮戊二酸、林可霉素和山莨菪碱的缓冲炭酵母提取物琼脂(BCYEαLA)运送培养基]对百日咳鲍特菌存活情况的影响,结果显示4 ℃时使用Regan-Lowe运送培养基运输百日咳鲍特菌存活率最高。

另1项研究显示,与4和-20 ℃相比,存储于-70 ℃悬浮液中的百日咳鲍特菌存活率更高。

WHO关于百日咳(2018版)采样标本的推荐:

咳嗽4周内,使用无菌的涤纶、人造丝或植绒拭子尽量采集双份鼻咽拭子(可使用鼻咽吸取液),一份用于细菌培养,另一份用于PCR检测。用于培养者需立即接种平板或者将鼻咽拭子放入Regan-Lowe运送培养基中(勿使用Amies或者通用运送液),室温放置,于24 h内送至实验室进行接种;仅用于PCR检测者则将鼻咽拭子置于无菌容器中(干或含通用转运液)转运至实验室;咳嗽4~12周内,则收集血清标本,用于抗体的检测。

美国CDC推荐:

Amies运送培养基(含活性炭)参数

使用涤纶、人造丝或者植绒拭子,无菌采集鼻咽拭子后,若用于细菌培养,置于Regan-Lowe运送培养基或含活性炭Amies运送培养基中,保存温度为2~8 ℃,并于24~72 h内运送;若仅用于PCR检测,则将鼻咽拭子置于无菌容器中(干或者含通用转运液),置于-20 ℃及以下冻存。对于鼻咽吸取液,无菌吸取至少0.5 ml样品,置于防渗漏的无菌塑料管中,2~8 ℃保存,在72 h内运送至实验室,否则于-20 ℃及以下冻存。

推荐理由:GDG推荐采集鼻咽拭子和鼻咽洗液用于百日咳鲍特菌检测,鼻咽拭子采集方便,优先推荐。鼻咽拭子用涤纶、人造丝或植绒拭子,与WHO和美国CDC推荐相一致,标本保存温度以美国CDC为准,因为其推荐与大多数的研究结果一致。

 以上内容来摘抄微信公众号中华医学杂志 ,作者中华医学杂志。

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